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江苏省pcr上岗证题库及答案

一、单选题（每题2分，共30分）

1.PCR技术的发明者是谁？

A.穆利斯

B.桑格

C.吉尔伯特

D.沃森

2.PCR反应中，引物的作用是？

A.提供模板

B.催化反应

C.引导DNA合成

D.提供能量

3.以下哪种不是PCR反应的基本成分？

A.dNTP

B.Taq酶

C.限制性内切酶

D.引物

4.PCR反应的温度循环一般不包括以下哪个阶段？

A.变性

B.退火

C.延伸

D.复性

5.对于PCR反应体系中模板DNA的量，一般要求是？

A.越多越好

B.越少越好

C.适量

D.无要求

6.提高PCR反应特异性的方法不包括？

A.提高退火温度

B.增加引物浓度

C.优化引物设计

D.使用高保真酶

7.PCR产物的检测方法不包括？

A.凝胶电泳

B.核酸杂交

C.蛋白质电泳

D.测序

8.实时荧光定量PCR技术中，荧光信号的产生依赖于？

A.模板的扩增

B.引物的结合

C.探针的水解

D.酶的活性

9.以下哪种荧光染料常用于实时荧光定量PCR？

A.溴化乙锭

B.SYBRGreenI

C.地高辛

D.罗丹明

10.在PCR反应中，Mg2+浓度过高可能导致？

A.特异性增强

B.非特异性扩增增加

C.反应速度减慢

D.酶失活

11.PCR反应体系中，dNTP的浓度一般为？

A.0.1-0.2mmol/L

B.0.2-0.5mmol/L

C.0.5-1mmol/L

D.1-2mmol/L

12.逆转录PCR（RT-PCR）中，首先要进行的步骤是？

A.cDNA合成

B.RNA提取

C.PCR扩增

D.引物设计

13.多重PCR是指？

A.多个模板同时扩增

B.多个引物同时扩增

C.多个酶同时使用

D.多个反应体系同时进行

14.巢式PCR的优点不包括？

A.提高特异性

B.增加灵敏度

C.简化操作

D.减少非特异性扩增

15.不对称PCR主要用于制备？

A.双链DNA

B.单链DNA

C.环状DNA

D.线粒体DNA

二、多选题（每题3分，共30分）

1.PCR技术可应用于以下哪些方面？（）

A.基因克隆

B.遗传病诊断

C.病原体检测

D.肿瘤诊断

E.法医鉴定

2.PCR反应体系中，影响反应特异性的因素有（）

A.引物设计

B.Mg2+浓度

C.退火温度

D.Taq酶活性

E.dNTP浓度

3.实时荧光定量PCR技术的优点包括（）

A.灵敏度高

B.特异性强

C.可实现绝对定量

D.操作简便

E.可同时检测多个样本

4.以下哪些属于PCR反应的延伸温度范围？（）

A.55℃

B.60℃

C.65℃

D.72℃

E.80℃

5.PCR产物常见的污染来源有（）

A.实验室环境

B.试剂

C.模板DNA

D.操作人员

E.仪器设备

6.逆转录PCR（RT-PCR）中常用的逆转录酶有（）

A.AMV逆转录酶

B.M-MLV逆转录酶

C.Taq酶

D.Klenow片段

E.RNaseH

7.多重PCR技术在应用中可能遇到的问题有（）

A.引物之间的相互作用

B.扩增效率不一致

C.模板竞争

D.反应体系复杂

E.检测难度大

8.巢式PCR中，内外层引物的设计原则包括（）

A.外层引物特异性高

B.内层引物特异性低

C.内外层引物退火温度有差异

D.内外层引物扩增片段有重叠

E.内外层引物长度相近

9.不对称PCR中，两条引物的比例一般为（）

A.1:1

B.1:5

C.1:10

D.1:50

E.1:100

10.用于PCR产物检测的凝胶电泳中，常用的凝胶类型有（）

A.琼脂糖凝胶

B.聚丙烯酰胺凝胶

C.硝酸纤维素凝胶

D.硅胶凝胶

E.淀粉凝胶

三、判断题（每题2分，共20分）

1.PCR技术只能扩增DNA，不能扩增RNA。（）

2.PCR反应中，引物的长度一般为15-30bp。（）

3.实时荧光定量PCR技术可以直接对原始模板进行定量。（）

4.提高PCR反应的退火温度可以降低非特异性扩增。（）

5.PCR产物的污染不会影响后续实验结果。（）

6.逆转录PCR是将RNA逆转录为DNA后再进行PCR扩增。（）

7.多重PCR可以同时扩增多个不同的DNA片段。（）

8.巢式PCR比普通PCR的特异性更高。（）

9.不对称PCR产生的单链DNA主要用于测序等研究。（）

10.PCR产物检测时，溴化乙锭可以直接加