SOP-QC10018 培养基适用性检查标准操作规程.pdfVIP

培养基适用性检查标准操作规程

1.目的

1.目的

建立培养基配制适用性检查的标准操作规程，规范实验人员的操作。

2.范围

适用于微生物检验人员对培养基的规范管理。

3.依据

药品生产质量管理规范（2010年版修订）、《中华人民共和国药典》第四部

4.职责

4.1微生物检验员：负责实验室所需求的培养基管理工作，使日常检验正常进行。

4.2微生物检验主管：负责对日常配制培养基的规范操作进行监督。

5.程序

5.1培养基的贮藏

5.1.1未开封的胶水培养基贮存于阴谅室，使用培养基处于低温、干燥、和避光条件下。

开封的胶水培养基应盖紧，贮存于阴谅库。

5.1.2灭菌好的培养基应进行预培养72h检查无菌后，置4～8℃冷藏保存，培养基储存期

为7天。

5.2培养基的配制应填写培养基配制及使用记录。供试品微生物计数中所使用的培养基应

进行适用性检查。

5.3培养基的质量控制

5.3.1计数培养基适用性检查

菌种及菌液制备

菌种试验用菌株的传代次数不得超过5代(从菌种保藏中心获得的干燥菌种为第0代)，

并采用适宜的菌种保藏技术进行保存，以保证试验菌株的生物学特性。计数培养基适用性

检查和计数方法适用性试验用菌株见表1。

菌液制备按表1规定程序培养各试验菌株。取金黄色葡萄球菌、铜绿假单胞菌、枯草芽

孢杆菌、白色念珠菌的新鲜培养物，用pH7.0无菌氯化钠-蛋白胨缓冲液或0.9%无菌氯化

钠溶液制成适宜浓度的菌悬液;取黑曲霉的新鲜培养物加入适量含0.05%(ml/mI)聚山梨

酯80的pH7.0无菌氯化钠-蛋白胨缓冲液或含0.05%(mI/mI)聚山梨酯80的0.9%无菌

氯化钠溶液，将孢子洗脱。然后，采用适宜的方法吸出孢子悬液至无菌试管内，用含0.05%

(mI/ml)聚山梨酯80的pH7.0无菌氯化钠-蛋白胨缓冲液或含0.05%(mI/ml)聚山梨酯

80的0.9%无菌氯化钠溶液制成适宜浓度的黑曲霉孢子悬液。

菌液制备后若在室温下放置，应在2小时内使用;若保存在2～8C,可在24小时内使用。

黑曲霉孢子悬液可保存在2～8°C，在验证过的贮存期内使用。

阴性对照

为确认试验条件是否符合要求，应进行阴性对照试验，阴性对照试验应无菌生长。如阴性

对照有菌生长，应进行偏差调查。

按表1规定，接种不大于100cfu的菌液至胰酪大豆胨液体培养基管、琼脂培养基平板或沙

氏葡萄糖琼脂培养基平板，置表1规定条件下培养，平行制备2管或2个平皿，同时，用相

应的对照培养基替代被检培养基实验。

被检固体培养基上的菌落平均数与对照培养基上的菌落平均数的比值在0.5～2范围内，

且菌落形态大小应与对照培养基上的菌落一致;被检液体培养基管与对照培养基管比较，

试验菌应生长良好。

表1试验菌液的制备和使用

计数培养基适用性检查计数方法适用性试验

试验菌液的制

试验菌株

备需氧菌总数计霉菌和酵母需氧总数计数霉菌和酵母

数菌总数计数菌总数计数

金黄色葡萄胰酪大豆胨琼胰酪大豆胨琼胰酪大豆胨琼

球菌脂培养基或胰脂培养基和胰脂培养基或胰

（Staphylococc酪大豆胨液体酪大豆胨液体酪大豆胨液体

usaureus）培养基，培养温培养基，培养温培养基（MPN

[CMCC（B）26度30～35℃，度30～35℃，培法），培养温度

003]培养时间18～养时间不超过330～35℃，培

24小时天，接种量