基于MALDI-MS和UHPLC-MS_MS的微量活细胞系蛋白质快速分析.pdfVIP

第46卷第2期质谱学报Vol.46No.2

2025年3月JournalofChineseMassSpectrometrySocietyMar.2025

基于MALDI-MS和UHPLC-MS/MS的

微量活细胞系蛋白质快速分析

闫凌

（宁波东方理工大学（暂名），浙江宁波315100）

摘要：本研究结合基质辅助激光解吸电离质谱（MALDI-MS）和超高效液相色谱-串联质谱（UHPLC-MS/MS）技

术，系统地探索了功能化微型酶反应器在微量活细胞系蛋白质组快速分析中的应用，并对其分析效能进行全面评

估。通过将功能化酶纳反应器封装于枪头内，结合盐酸胍和双酶系统（胰酶与DNaseI），实现了细胞裂解、蛋白

质提取和酶解的一体化操作，显著提高了蛋白质提取和酶解效率。结果表明，该方法在处理微量细胞样品

（1×104个细胞）时，蛋白质提取效率显著优于传统的过滤器辅助样品前处理（FASP）流程。活细胞样品在酶纳反

应器中的反应时间仅需6min，整个分析流程不超过1h，展示了功能化酶纳反应器在高通量在线前处理方面的巨

大潜力。本研究不仅为微量活细胞系蛋白质组的快速高通量分析提供了技术平台，还通过MALDI-MS与

UHPLC-MS/MS整合策略实现了微量蛋白质组学前处理方法的全面评估与应用。

关键词：基质辅助激光解吸电离质谱（MALDI-MS）；超高效液相色谱-串联质谱（UHPLC-MS/MS）；功能化微型酶

反应器；蛋白质组学；微量活细胞；前处理

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中图分类号：O657.63文献标志码：A文章编号：1004-2997(2025)02-0133-07

DOI：10.7538/zpxb.2025.0013CSTR：32365.14.zpxb.2025.0013

RapidAnalysisofTraceAmountofProteinsinLiveCells

UsingMALDI-MSandUHPLC-MS/MS

YANLing

（NingboEasternInstituteofTechnology,Ningbo315100,China）

Abstract:Proteomicanalysishasbecomeacornerstoneofmodernbiomedicalresearch,providing

criticalinsightsintophysiologicalandpathologicalprocesseswithin