北师社兽医临床诊疗技术教学课件3.2.2 血清总蛋白、白蛋白及球蛋白的测定.pptxVIP

实验室诊断—血液生化检验技能一血糖的测定技能二血清总蛋白、白蛋白及球蛋白的测定技能三血清各类离子的测定技能四血浆二氧化碳结合力的测定技能五血清酶学检验

在碱性溶液中，蛋白质分子中的肽键与铜离子作用，形成紫红色的复合物。此反应与两个尿素分子缩合生成缩二脲，在碱性条件下与铜离子作用形成的紫红色反应相似，故称为双缩脲反应。一、总蛋白的测定——双缩脲法测定总蛋白原理

缩二脲在540nm波长有最大吸收，故颜色强度与蛋白质的量成正比，与同样处理的标准蛋白比较，可求得蛋白质含量。一、总蛋白的测定——双缩脲法测定总蛋白原理

该反应与蛋白质的—R基和蛋白质的分子量均无关，血浆中各种蛋白质显色程度基本相同，若能严格控制反应条件（如试剂组分、pH、反应温度等），则该法是血浆（血清）蛋白测定的理想方法。一、总蛋白的测定——双缩脲法测定总蛋白原理

器材：电子天平、离心机分光光度计或半自动生化分析仪、水浴箱烧杯、容量瓶、试管、试管架、移液管移液器、记号笔等器材与试剂

试剂：6mol/L氢氧化钠溶液：将120g氢氧化钠溶解于蒸馏水中，然后稀释至500mL，置聚乙烯瓶内保存。器材与试剂

双缩脲试剂：称取未风化、没有丢失结晶水的硫酸铜(CuSO·5H2O)3g和酒石酸钾钠(KNaCAH4O4·4H2O)9g，先分别溶于适量蒸馏水中，加入碘化钾5g，待完全溶解后混合，加入6m