第五章基因工程载体.pptVIP

载体类型

基因工程所用的载体都经过人工重新构建;克隆载体与表达载体

克隆载体：携带外源DNA进入受体细胞并使外源DNA大量扩增。

表达载体：表达外源基因编码的蛋白质，载体克隆位点的上游应含有启动子，下游含有转录终止序列。;第一节.质粒;野生型质粒的大小一般在2-200Kb

基因工程常用质粒在2-4Kb之间

质粒并不是细菌生长所必须的，但可为宿主执行一定的遗传功能，如抗生素的抗性、重金属离子的抗性、细菌毒素的分泌等。;质粒(plasmid);1.质粒类型:

严紧型质粒(stringentplasmid)

1-5个拷贝/细胞;2.质粒载体必须具备的条件;（3）具有多个限制性内切酶的单一切点，便于外源基因的插入。如果在这些位点有外源基因的插入，会导致某种标志基因的失活，而便于筛选。

;质粒性质

不相容性（不亲和性）具有相同或相似复制子结构及特征的两种不同质粒，不能稳定的存在于同一受体细胞内，这种现象称作质粒的不相容性。

;3.质粒载体的选择性标记;抗菌素名称抗菌素作用方式宿主菌抗性机理;复制起点;常用的质粒载体;;;;4.融合表达载体

如GST融合表达系统。载体中含有细菌的谷胱甘肽巯基转移酶（GST）基因，外源基因克隆在GST