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分子诊断试剂工程师考试试卷及答案

一、填空题（共10题，每题1分）

1.PCR反应的基本步骤包括变性、______和延伸。

2.核酸提取中常用的蛋白酶K作用是______。

3.荧光定量PCR中，SYBRGreenI染料结合于______。

4.分子诊断中区分野生型和突变型的常用技术是______（举一种）。

5.基因芯片的核心原理是______。

6.用于SNP检测的方法除PCR-RFLP外，还有______（举一种）。

7.NGS建库关键步骤包括片段化、末端修复、加A尾和______。

8.分子诊断试剂中内参基因的作用是______。

9.校准品的作用是______。

10.实时荧光定量PCR中Ct值的含义是______。

二、单项选择题（共10题，每题2分）

1.PCR反应的核心酶是？

A.限制性内切酶B.TaqDNA聚合酶C.逆转录酶D.连接酶

2.酚-氯仿抽提法的主要作用是？

A.沉淀核酸B.去除蛋白和脂类C.溶解核酸D.抑制核酸酶

3.TaqMan探针5’端标记的是？

A.淬灭基团B.报告基团C.生物素D.地高辛

4.RNA病毒检测常用技术是？

A.普通PCRB.巢式PCRC.RT-PCRD.数字PCR

5.RNA样本用于基因芯片检测前需进行？

A.逆转录B.甲基化C.磷酸化D.乙酰化

6.数字PCR的核心优势是？

A.绝对定量B.相对定量C.高灵敏度D.低成本

7.检测拷贝数变异（CNV）的技术是？

A.MLPAB.RFLPC.AS-PCRD.基因芯片

8.分子诊断试剂有效期取决于？

A.包装材料B.酶活性C.染料稳定性D.以上都是

9.病原体耐药基因检测常用方法是？

A.测序法B.电泳法C.比色法D.免疫法

10.乙醇沉淀核酸的作用是？

A.溶解核酸B.沉淀核酸C.去除杂质D.灭活酶

三、多项选择题（共10题，每题2分）

1.PCR反应体系成分包括？

A.模板DNAB.Taq酶C.dNTPD.引物

2.核酸提取常用方法有？

A.酚-氯仿抽提法B.磁珠法C.硅胶膜法D.煮沸法

3.荧光定量PCR定量方式包括？

A.绝对定量B.相对定量C.半定量D.定性

4.分子诊断常用探针类型有？

A.TaqMan探针B.Scorpion探针C.MolecularBeacon探针D.SYBRGreenI

5.NGS应用领域包括？

A.肿瘤诊断B.遗传病检测C.病原体检测D.药物基因组学

6.校准品要求包括？

A.靶值准确B.稳定性好C.基质一致D.可溯源

7.SNP检测技术有？

A.PCR-RFLPB.TaqMan探针法C.测序法D.MLPA

8.试剂质量控制指标包括？

A.精密度B.准确度C.线性范围D.特异性

9.RNA提取注意事项有？

A.避免RNA酶污染B.低温操作C.RNase抑制剂D.快速提取

10.数字PCR应用场景包括？

A.低丰度突变检测B.CNV分析C.绝对定量D.病原体载量检测

四、判断题（共10题，每题2分）

1.PCR退火温度越高，特异性越强。

2.磁珠法核酸提取不需要离心步骤。

3.SYBRGreenI只结合双链DNA。

4.RT-PCR可检测DNA病毒。

5.基因芯片探针是固定的已知核酸序列。

6.数字PCR的Ct值与模板浓度线性相关。

7.内参基因表达量在不同组织完全一致。

8.校准品可校准检测系统准确性。

9.测序法可检测所有基因突变类型。

10.分子诊断试剂通常储存在-20℃或-80℃。

五、简答题（共4题，每题5分）

1.简述PCR反应的基本原理。

2.简述核酸提取磁珠法的优势。

3.简述TaqMan探针的工作原理。

4.简述分子诊断试剂质量控制的主要内容。

六、讨论题（共2题，每题5分）

1.比较数字PCR（dPCR）与实时荧光定量PCR（qPCR）的应用差异。

2.讨论RNA病毒（如新冠病毒）分子诊断试剂的开发关键要点。

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答案部分

一、填空题答案

1.退火（复性）

2.降解蛋白质（去除蛋白污染）

3.双链DNA

4.等位基因特异性PCR（AS-PCR）（或TaqMan探针法）

5.核酸分子杂交

6.TaqMan探针法（或测序法）

7.连接接头

8.校正加样误差和扩增效率差异

9.建立检测结果与靶值的对应关系

10.荧光信号达阈值时的循环数

二、单项选择题答案

1.B2.B3.B4.C5.A6.A7.A8.D9.A10.B

三、多项选择题答案

1.ABCD2.ABCD3.AB4.ABC5.ABCD6.ABCD7.ABC8.ABCD9.ABCD10.ABCD

四、判断题答案

1.√2.√3.√4.×5.√6.×7.×8.√9.√10.√

五、简答题答案

1.PCR基于DNA双链复制原理，通过变性（94℃解旋为单链）、退火（50-65℃引物结合模板）、延伸（72℃Taq酶合成新链）三步