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腺胃型IBV的分离鉴定及不同致病型毒株组织嗜性的比较研究

一、引言

1.1鸡传染性支气管炎概述

1.1.1病原学

鸡传染性支气管炎（AvianInfectiousBronchitis，IB）是由鸡传染性支气管炎病毒（InfectiousBronchitisVirus，IBV）引起的一种急性、高度接触性传染病，对全球养鸡业造成了巨大的经济损失。自1930年在美国首次被发现以来，IBV已在世界范围内广泛传播。

IBV属于冠状病毒科冠状病毒属，病毒粒子呈球形或多形性，直径约80-120nm，具有囊膜和纤突结构。其基因组为单股正链RNA，长度约27.6kb，是已知RNA病毒中基因组最大的病毒之一。基因组包含多个开放阅读框（ORFs），编码多种结构蛋白和非结构蛋白。其中，纤突蛋白（S）、膜蛋白（M）和核衣壳蛋白（N）是主要的结构蛋白。S蛋白是病毒的主要抗原蛋白，其变异与病毒的血清型多样性密切相关，在病毒感染宿主细胞过程中，S蛋白不仅参与病毒与宿主细胞表面受体的结合，还介导病毒囊膜与宿主细胞膜的融合，决定了病毒的组织嗜性和血清型特异性。

1.1.2流行病学

IBV在全球范围内广泛分布，不同地区的流行毒株存在差异。该病一年四季均可发生，但在冬春季节较为高发，这可能与低温环境下鸡的免疫力下降以及病毒在环境中的稳定性增加有关。各种年龄的鸡均易感，雏鸡和产蛋鸡发病后危害更为严重。雏鸡感染后，常出现生长发育受阻、死亡率增加等情况；产蛋鸡感染则会导致产蛋量下降、蛋品质降低，给养殖户带来巨大的经济损失。

IBV主要通过呼吸道和消化道传播。病鸡和带毒鸡是主要传染源，病毒从病鸡呼吸道排出，形成含有病毒的气溶胶，经飞沫传给易感鸡；也可通过污染的饲料、饮水、用具等经消化道传染。此外，IBV还可通过垂直传播感染雏鸡，虽然垂直传播的比例相对较低，但对于种鸡场的危害极大，可能导致整批雏鸡感染，影响鸡群的健康和生产性能。

近年来，随着养鸡业的规模化和集约化发展，鸡只饲养密度增加，IB的传播速度加快，疫情的爆发频率和危害程度呈上升趋势。同时，疫苗免疫的广泛应用也对病毒的进化产生了选择压力，导致新的变异株不断出现，增加了防控的难度。

1.1.3诊断方法

鸡传染性支气管炎的诊断方法主要包括临床诊断、实验室诊断等。临床诊断主要依据鸡群的症状表现，如咳嗽、喷嚏、气管啰音等呼吸道症状，肾脏肿大、苍白、尿酸盐沉积等泌尿系统病变，以及产蛋量下降、蛋品质降低等生殖系统问题。然而，这些症状并非IB所特有，其他呼吸道疾病或传染病也可能出现类似症状，因此临床诊断只能作为初步判断，确诊还需依靠实验室诊断方法。

实验室诊断方法包括血清学检测和分子生物学检测。血清学检测方法如酶联免疫吸附试验（ELISA）、血凝抑制试验（HI）等，通过检测鸡血清中的特异性抗体来判断鸡群是否感染IBV。ELISA具有操作简便、快速、灵敏度高等优点，可用于大规模的鸡群检测；HI试验则具有较高的特异性，常用于病毒血清型的鉴定。分子生物学检测方法如反转录聚合酶链式反应（RT-PCR）、实时荧光定量PCR（qRT-PCR）等，能够直接检测病毒的核酸，具有更高的灵敏度和特异性。RT-PCR可扩增病毒的特定基因片段，通过电泳分析判断结果；qRT-PCR则能够对病毒核酸进行定量检测，可用于病毒感染的早期诊断和病毒载量的监测。此外，病毒分离培养也是一种重要的诊断方法，通过将病料接种到鸡胚或细胞上，观察病毒的生长情况，进行病毒的分离和鉴定，该方法虽然准确性高，但操作繁琐、耗时较长，对实验室条件要求较高。

1.2鸡传染性支气管炎病毒组织嗜性的研究进展

1.2.1IBV致病型分类

根据感染鸡所表现出的主要症状和病变部位，IBV可分为多种致病型，其中常见的有呼吸型、肾型、腺胃型等。

呼吸型IBV主要侵害鸡的呼吸系统，感染鸡常表现出咳嗽、喷嚏、气管啰音、呼吸困难等症状。在病死鸡的剖检中，可发现呼吸道有病变，气管中存在黄褐色的栓塞物、黏液，且气管出血。呼吸型IBV在雏鸡中尤为常见，可导致雏鸡生长发育受阻，死亡率增加。

肾型IBV主要引起鸡的肾脏病变，常见于20-50日龄的仔鸡。感染初期，鸡会出现轻微的呼吸道症状，如啰音、喷嚏、咳嗽等，但这些症状通常较轻微，容易被忽视。持续1-4天后，呼吸道症状消失，鸡群突然大量发病，表现为厌食、口渴、精神不振、拱背扎堆，排水样白色稀粪，粪便内含大量尿酸盐，肛门周围羽毛污浊。病鸡因脱水而体重减轻，胸肌发绀，严重的面部及全身皮肤颜色发暗干燥，腿颈部干。肾型IBV感染的病死鸡剖检可见双肾肿大、苍白，肾小管因聚集尿酸盐使肾脏呈槟榔样花斑状，两侧输尿管因沉积尿酸盐而变得明显扩张、增粗发白。

腺胃型IBV主要侵害鸡