转染试剂 使用说明书(通用标准版).docxVIP

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  • 2026-03-24 发布于山西
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转染试剂 使用说明书(通用标准版).docx

转染试剂使用说明书(通用标准版)

一、产品名称

细胞转染试剂(脂质体型)

二、产品用途

用于将质粒DNA、siRNA、miRNA、寡核苷酸等核酸导入体外培养的真核细胞,适用于贴壁细胞、部分悬浮细胞。

三、储存条件

2~8℃冷藏保存

严禁冷冻、避免反复冻融

避光、密封

四、适用范围

质粒DNA转染

siRNA/miRNA转染

共转染(DNA+siRNA)

五、试剂准备(通用体系)

所有操作在无菌环境下进行。以24孔板为例(可按比例缩放):

细胞接种

转染前18–24h接种细胞

转染时汇合度60%–90%为宜

溶液A(核酸稀释液)

质粒DNA:0.6–1.0μg/孔

加入50μL无血清培养基,轻轻混匀

溶液B(转染试剂稀释液)

转染试剂:1.5–3.0μL/孔

加入50μL无血清培养基,轻轻混匀

室温静置5min

混合

将A与B混合,轻轻混匀

室温静置15–20min

加入细胞

缓慢滴加到细胞培养孔中

轻轻晃动混匀

培养与检测

37℃、CO?培养

6–12h可更换为完全培养基

24–72h检测表达/干扰效果

六、关键参数(参考)

DNA:转染试剂比例:1μg:2–3μL(贴壁细胞常用)

转染最佳时间:24–48h(荧光/蛋白表达)

悬浮细胞:需提高试剂用量,延长孵育时间

七、注意事

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