基因工程的基本操作程序-2025-2026学年高二下学期生物人教版选择性必修3.pptxVIP

基因工程的基本操作程序

培育转基因抗虫棉的基本过程基因工程的基本操作程序

一、目的基因的筛选与获取1.目的基因：Cry基因

目的基因CRY序列NCBI：/2.获取方法：人工合成；基因文库；PCR扩增技术

体内DNA复制参与的组分在DNA复制中的作用PCR中参与的组分打开DNA双链提供DNA复制的模板合成子链的原料催化合成DNA子链使DNA聚合酶能够从引物的3′端开始连接脱氧核苷酸解旋酶DNA母链4种脱氧核苷酸DNA聚合酶引物(通常为小的单链RNA)无需解旋酶，用高温代替DNA母链4种脱氧核苷酸耐高温的DNA聚合酶引物(通常为小的单链DNA)反应还需要其它条件，如缓冲液（添加Mg2+等）3.PCR扩增的物质条件及作用

探究活动一：请根据载体和目的基因序列设计出扩增目的基因的一对引物。目的基因Cry(2427bp，中间大部分序列省略展示)：复制原点四环素SmaICCC↓GGGBamHIG↓GATCCHindIIIA↓AGCTTRcoRIG↓AATTC注：目的基因序列内部无四种限制酶的识别序列。EcoRI5’ATGACAAA.......AAAAATAA3’3’TACTGTTT......TTTTTATT5’上游引物1：下游引物2：编码链模板链

引物设计原则：引物与一段已知目的基因的核苷酸序列碱基互补配对；目的基因两侧无酶切位点时，可以在引物的5’端添加限