分子克隆常用工具酶.ppt

分子克隆常用工具酶演示文稿;每一单链具有5’-3’极性

两条单链间以氢键连接

两条单链,极性相反,反向平行

以中心为轴,向右盘旋;植物基因工程;Replication;分子克隆操作过程:

克隆目的基因→将目的基因与载体用限制性内切酶切割和连接,制成重组DNA→导入宿主细胞→筛选、鉴定→扩增和表达。;工具酶是指能用于DNA和RNA分子的切割、连接、聚合、反转录等有关的各种酶系统称为工具酶。

要把不同基因的DNA线形分子片段准确地切出来,需要各种限制性核酸内切酶(restrictionendonuclease);要把不同片段连接起来,需要DNA连接酶(ligase);要合成基因或其中的一个片段,需要DNA聚合酶(polymerase)等。

因此,酶是DNA重组技术中必不可少的工具。;核酸水解酶类;限制性核酸内切酶

DNA连接酶

DNA聚合酶

核酸酶

核酸修饰酶;工具酶名称;第一节分子克隆最常用两个工具酶;限制性内切酶Restrictionenzymes;限制性内切酶是一种能识别DNA上特定碱基组成的序列并在这些序列位点上切断DNA分子水解磷酸二酯键的一种内切核酸酶。;;二、限制性核酸内切酶的命名原则;一般分子量为60kd,单链多肽,最适pH为

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