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玻片粘附处理标准方法

一、处理目的

让组织切片、细胞牢固贴附在玻片上，防止在烤片、脱蜡、水化、抗原修复、染色过程中脱片、卷片、掉片。

二、常用粘附剂

多聚赖氨酸（PLL）——最常用、最通用

明胶+铬明矾——经济、传统

APES（氨丙基三乙氧基硅烷）——粘附强，适合难贴组织

商品化防脱玻片——直接用，无需处理

三、标准处理步骤（以最常用多聚赖氨酸PLL为例）

1.玻片预处理（必须）

玻片用洗洁精刷洗

自来水冲净→蒸馏水冲净

烘干/晾干

浸泡无水乙醇30min

晾干，保证无油、无尘、无杂质

2.多聚赖氨酸包被（0.01%或0.1%）

将干净玻片完全浸泡在PLL工作液中10min

缓慢取出，垂直沥干

室温晾干2h以上或37℃烘干

4℃密封保存，1个月内使用

四、APES法（粘附更强，适合难贴切片）

玻片洗净晾干

浸入1:50丙酮稀释APES液20~30秒

取出停10秒

丙酮洗1次→蒸馏水洗2次

烘干备用

特点：结合牢固，耐抗原修复（高温高压）。

五、明胶-铬明矾法（低成本）

明胶1g+铬明矾0.1g+蒸馏水200ml

40℃加热溶解

玻片浸5min→晾干

六、处理后玻片使用要点

处理后玻片要防尘、防潮

白片、冰冻切片、石蜡切片都可使用

贴片后37℃烤片4～12h或60