革兰染色法董慧69课件讲解.pptxVIP

革兰染色法GRAMSTAINING董慧

革兰染色法（Gram染色）丹麦科学家Gram于1884年发明的一种鉴别细菌的染色法。可将细菌鉴别为革兰氏阳性G+菌和革兰氏阴性G-菌两大类。丹麦科学家Gram最经典、最常用的染色方法

G+菌与G-菌细胞壁的比较细胞壁革兰阳性菌 革兰阴性菌肽聚糖组成聚糖骨架聚糖骨架?四肽侧链四肽侧链?五肽交联桥?胞壁厚度厚，20-80nm薄，10-15nm肽聚糖层数可多达50层1-3层肽聚糖含量50%-80%5%-20%坚韧度强弱磷壁酸有无结构类型三维空间结构二维网状结构脂类含量少（占1-4%）多（11-22%）外膜无有

革兰染色法（Gram染色）原理影响革兰染色的关键步骤是脱色

革兰兰阳性与革兰阴性细菌脱色效果比较革兰阳性细菌的细胞壁主要由肽聚糖形成的网状结构组成、壁厚、类脂质含量低，用乙醇（或丙酮）脱色时细胞壁脱水、使肽聚糖层的网状结构孔径缩小，透性降低，从而使结晶紫碘的复合物不易被洗脱而保留在细胞内，经脱色和复染后仍保留初染剂的蓝紫色。革兰阴性菌则不同，由于其细胞壁肽聚糖层较薄、类脂含量高，所以当脱色处理时，类脂质被乙醇溶解，细胞壁透性增大，使结晶紫碘的复合物比较容易被洗脱出来，用复染剂复染后，细胞被染上复染剂的红色。

操作方法注：染液不宜滴加过多，每一步均需细流水冲洗。结晶紫初染60秒碘液媒染60秒95%乙醇数滴，脱色约30秒稀释复红液，复染30秒