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生物制药与研发手册

第1章生物制药基础与法规合规

1.1细胞与基因治疗（CGT）技术原理

CGT技术通过向患者体内引入外源DNA或RNA分子，利用宿主细胞的基因编辑系统或转录后修饰系统，实现基因功能的纠正或增强。其核心在于利用CRISPR-Cas9等基因编辑工具，在细胞内精准切割靶基因序列，随后通过同源重组修复（HDR）或非同源末端连接（NHEJ）机制，将治疗性基因序列整合到基因组中。在治疗机制上，针对遗传性疾病，CGT旨在通过沉默致病性突变基因或激活正常功能基因来恢复生理功能。例如，在遗传性失明疾病中，通过递送视杆细胞发育关键基因，可诱导视杆细胞分化并恢复视觉功能，其临床疗效观察显示，治疗剂量下细胞存活率通常维持在90%以上，且无明显的细胞毒性反应。

对于单基因遗传病，如镰状细胞贫血，CGT策略涉及构建包含正常血红蛋白基因（HBB）与突变基因（HBB）的双等位基因载体，通过诱导基因转换（GeneConversion）机制，将突变等位基因替换为正常等位基因，从而彻底消除血红蛋白S异常表达。针对多基因遗传病，如地中海贫血，治疗难度较大，因为需要同时纠正多个基因位点的突变。目前的研究进展包括设计多基因编辑载体，利用重叠延伸PCR（Overlap-ExtensionPCR）技术，在修复一个突变位点时同步修复邻近的另一个突变位点，显著提高了修