数字PCR（dPCR）ctDNA定量检测.ppt

多重数字PCR检测技术08多色荧光标记策略通过不同发射光谱的荧光染料（如FAM、HEX、CY5）标记探针，实现多靶标区分。QIAcuity系统支持双通道检测，可组合出12种荧光编码。荧光基团组合采用光学滤光片阵列和分光系统，确保各荧光信号无交叉干扰，提高检测特异性。微滴式ddPCR平台通过油包水微滴实现物理分隔。光谱分离技术基于泊松分布校正荧光信号重叠，通过阈值分割和聚类分析区分弱阳性信号。微流控芯片平台采用高密度微孔阵列提升分辨率。信号解析算法通过调整荧光探针浓度比例（1:1至1:10）覆盖不同丰度靶标，线性范围可达5个数量级，适用于突变等位基因频率0.1%-50%的检测。