高中生物土壤分解尿素细菌实验方案.docxVIP

一、实验目的

本实验旨在引导学生从土壤环境中筛选出能够分解尿素的细菌，并通过一系列实验操作，加深对微生物分离、培养、筛选原理的理解，掌握相关的微生物学基本操作技能。同时，通过观察实验现象，使学生直观认识到土壤微生物的多样性及其在物质循环中的重要作用，培养科学探究能力与实验操作的严谨性。

二、实验原理

尿素是一种重要的氮肥，但植物不能直接吸收利用，需要土壤中的某些微生物将其分解为氨（NH?）后才能被吸收。能够分解尿素的细菌能够产生脲酶，脲酶可将尿素分解为氨和二氧化碳。本实验利用这一特性，采用以尿素为唯一氮源的选择培养基来筛选这类细菌。当培养基中的尿素被分解产生氨时，会使培养基的pH值升高，若在培养基中加入酚红指示剂，培养基颜色将由橙黄色变为红色，从而可以直观地判断目标菌落的存在。

三、实验材料与用具

（一）实验材料

1.土壤样品：可采集自校园、公园、农田等不同环境的表层土壤（注意避免采集刚施用过尿素化肥的土壤，以免影响筛选效果）。

2.培养基成分：尿素、葡萄糖、磷酸二氢钾（KH?PO?）、磷酸氢二钾（K?HPO?）、氯化钠（NaCl）、酚红指示剂、琼脂。

3.无菌水、体积分数为70%的酒精。

（二）实验用具

1.培养皿、锥形瓶（若干，用于配制培养基和稀释土壤悬液）、烧杯、量筒、玻璃棒、天平、药匙、pH试纸或pH计。

2.酒精灯、接种环、涂布器（或无菌玻璃刮铲）、