实验一-质粒DNA的提取.ppt

实验一质粒DNA的提取;实验目的

实验原理

实验仪器、材料与试剂

实验步骤

实验结果及讨论;实验目的;实验原理

;结构的三大要素：

多克隆位点

选择标记（耐药性，LacZ）

独立的复制单位

种类：

质粒

噬菌体

酵母人工染色体（YAC）

反转录病毒载体

表达载体等;;pET-32aVector;大家应该也有点累了，稍作休息;pET-32cloning/expressionregion;;;实验仪器、材料与试剂;（二）材料;（三）试剂;2.溶液Ⅰ：葡萄糖（50mmol/L）；Tris·HCl（25mmol/L，pH8.0）；EDTA（10mmol/L）

3.溶液Ⅱ：NaOH（0.2mol/L）；SDS（1%，新鲜配制）

4.溶液Ⅲ：60ml的5mol/LKAC；11.5ml的冰醋酸；28.5mlH2O;5.氨苄青霉素（Amp）

用无菌水配制成100mg/ml溶液，置-20℃冰箱保存备用。

6.RNaseA

将RNA酶A溶于10mmol/LTris.Cl(pH7.5)、15mmol/LNaCl中，配成10mg/ml的浓度，于100℃加热15分钟，缓慢冷却至室温，分装成小份保存于-20℃。

7.酚/氯仿(1:1)