实验动物肝脏提取.ppt

实验动物肝脏提取;（优选）实验动物肝脏提取;二、实验原理:;选材;研磨：将剪碎的动物组织置于研钵或匀浆器中，加入少量石英砂研磨或匀浆，破碎细胞。这种方法温和，适合实验室使用。

组织捣碎器：较剧烈的破碎细胞的方法，为了防止发热和升温过高，通常是转10秒—20秒，停10秒—20秒，可反复多次。

压榨法：在1000×105Pa—2000×105Pa的高压下使几十毫升的细胞悬液通过一个小孔突然释放至常压，细胞将彻底破碎。温和的、彻底破碎细胞的方法，但仪器费用较高。;反复冻融法：将待破碎的细胞冷至－15℃到－20℃，然后放于室温(或40℃)迅速融化，由于细胞内形成冰粒使剩余胞液的盐浓度增高而引起细胞溶胀破碎。

超声波处理法：借助超声波的振动力破碎细胞壁和细胞器。使用时注意降温，防止过热。

冷热交替法：在90℃左右维持数分钟，立即放入冰浴中使之冷却，如此反复多次，绝大部分细胞可以被破碎。;细胞破碎方法—化学方法;(三)除去RNA的方法;(四)除去蛋白质的方法;纯的DNA样品的获得;（二）琼脂糖凝胶电泳分离核酸的原理：;DNA分子在pH高于其等电点的溶液中带负电荷，在电场中向正极移动（电荷效应）。

DNA分子泳动速率的大小除与DNA分子的带电量有关外，还与DNA分子的大小和空间构象有关（琼脂糖凝胶的分子筛效应）。

电泳时，用溴酚蓝做前沿指示剂，用溴化乙啶（ethidiumb