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2025年生物制药技术与生产工艺手册

第1章生物制药原料与供应链

1.1细胞培养体系与培养基配方

培养基的配制是细胞培养成功的关键第一步，需严格遵循无菌操作规范，使用经过验证的无热原培养基，例如在制备重组人源化抗体时，必须使用不含牛血清白蛋白的无血清培养基，以避免免疫原性风险。培养基的浓度与营养成分配比需根据细胞类型精确计算，例如在维持人胚胎干细胞（hESCs）增殖时，DMEM培养基需添加10%的胎牛血清以提供必要的生长因子和细胞外基质，而CHO细胞培养则可能使用高葡萄糖的L19培养基。

培养基的pH值控制对细胞代谢至关重要，通常通过自动pH调节系统实时监测，当pH值偏离设定值（如7.2±0.1）时，系统需自动注入碳酸氢钠或盐酸进行微调，确保培养液酸碱度稳定。培养基的渗透压与离子强度需严格维持在生理范围，例如在培养线粒体蛋白时，培养基的渗透压需控制在300-350mOsm/kg，以防细胞因渗透压失衡导致破裂或死亡，同时严格控制钠离子浓度以避免毒性反应。培养基的终浓度需经过严格的无菌灌装测试，例如在大规模生产重组蛋白时，培养基的终蛋白浓度通常控制在1-5mg/mL之间，既要保证细胞有足够的营养储备，又要防止非特异性蛋白污染影响下游纯化。

培养基的批间一致性验证是质量管理的核心，需对每一批次培养基进行稳定性测试，例如在4℃、2