小麦基因转化技术：根癌农杆菌介导高效转化方法.pdfVIP

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小麦（TriticumaestivumL.）

和莱顿

本章描述了一种通过根癌农杆菌介导的小麦转化程序。使用新鲜分离的未成

熟胚、预培养的未成熟胚或胚性愈伤组织接种携带二元载体pMON18365的无毒

A.tumefaciens菌株C58（ABI），该载体含有带有内含子的‑葡萄糖醛酸酶（

GUS）和选择标记新霉素磷酸转移酶（NPT）II。接种后的外植体在含

有选择剂G418的愈伤组织诱导培养基上选择约2周。发育出的抗性愈伤组织块随后

被转移到含有选择剂和减少植物生长调节剂的培养基上进行植株再生和进一步选

择。从接种到R植株在土壤中建立大约需要2.5至3个月。所有植株都应形

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态正常并能结实。根据先前实验获得的数据，大约35%的植株含有单拷贝

的。

：根癌农杆菌；小麦；TriticumaestivumL.；植物转化；叶植物。

1.引言

小麦是世界上最