双光子和光谱扫描在激光共聚焦显微镜上的应用经验.ppt

双光子和光谱扫描在激光共聚焦显微镜上的应用经验浙江大学生命科学学院仪器与技术服务平台

机型：ZeissLSM710nlo32通道阵列PMT690-1080nm可调谐飞秒激光器

激光共聚焦显微镜的非常规应用利用双光子分辨目标荧光和自发荧光利用光谱扫描鉴定微弱荧光信号的真假转基因材料快速筛选嘈杂背景下的细胞计数非线性效应光刻和深度扫描模拟近红外光源

GFP标记水稻根中自发荧光的清除单光子激发，水稻根带有强烈的黄绿色自发荧光双光子激发，自发荧光为蓝色ex488nm，Lambdamodeex820nm,lambdamode

GFP标记水稻根中自发荧光的清除双光子激发下GFP荧光与自发荧光的波长分离，820nm激发时，仅采集493-542nm区间的信号以保证特异性Ex820nm,channelmode

土壤浸出液中外源GFP标记细菌浓度分析目的：了解土壤中的不同细菌间的竞争关系方法：等比掺入外源GFP标记菌体，设置多种环境条件问题：土壤标本背景嘈杂，往往带有各种带荧光的杂质颗粒解决：1固定样品体积2lambda成像检测GFP特异荧光3最大化pinhole

非线性效应：碳纳米管498518421原理：某些材料在双光子激发，会发射波长为激发光一半的荧光利用不同波长的双光子激光照射可能含碳纳米管的靶向药物，lambda扫描发现荧光信号呈现严格的倍频关系Ex850E