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- 2026-05-24 发布于江苏
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二轮微专题难点突破
引物与PCR;一、PCR/DNA复制为何需要引物?体内DNA复制和PCR中的引物有何区别?
;PCR中使用的引物应具备的特点:
①引物能与DNA模板的碱基进行互补配对。
②2种引物之间不能有互补的碱基序列,避免引物形成双链,导致扩增失败。
③某一引物不能存在局部碱基序列互补配对,避免自身出现折叠配对,无法和模板DNA结合。
④多数情况需要在2种引物的5端添加不同限制酶识别的碱基序列,扩增出的DNA片段可以使用相应限制酶切割后与载体正向连接。
⑤引物不能太短,以防扩增出非特异性DNA片段(非目的基因)。;二、引物设计的依据:一段已知的目的基因的碱基序列
1.已知:已知该生物的
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