实验一、RNA提取方法及原理
一、研究背景二、方法及原理
一、研究背景1.RNA研究的重要性DNA,RNA和蛋白质是三种重要的生物大分子,是生命现象的分子基础。DNA的遗传信息决定生命的主要性状,而mRNA在信息传递中起很重要的作用。其它两大类RNA,rRNA和tRNA,同样在蛋白质的生物合成中发挥不可替代的重要功能。因此mRNA、rRNA、tRNA在遗传信息由DNA传递到表现生命性状的蛋白质的过程中举足轻重。
2RNA分布不同丰度组织名称样品量总RNA含量高丰度肝脏1mg2-4μg脾脏1mg心脏1mg中丰度大脑1mg0.05-2μg胚胎1mg肾脏1mg肺1mg低丰度膀胱1mg0-0.05μg骨1mg脂肪1mg高丰度成纤细胞1050.5-1μg人白细胞105中丰度酵母1050.5-1.5μg拟南芥叶片1mg0.2-0.5μg低丰度烟草叶片1mg0.05-0.1μg玉米叶片1mg
二、方法及原理1、RNA的提取流程(1)样本前处理(2)细胞裂解(3)RNA的纯化及获得
RNA提取流程--样品前处理注意点选择新鲜血液,不得超过4小时选择新鲜的幼嫩组织选择处于生长旺盛的时期收集细胞选择新鲜组织,生长旺盛的组织
可将新鲜血液先进行红细胞裂解,得到的白细胞然后加入一定量的TRNzol,-70℃保存较长时间去掉培养基,加入一定
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