全血的提取及电泳.ppt

全血的提取及电泳;1.实验原理;;由于血液各组分成分颗粒大小及比重不同，利用明胶的吸附作用，使红细胞沉积在管底，从而与白细胞相分离。

通过SDS的破膜（细胞膜和核膜）作用，使白细胞释放出DNA。

然后利用酚和氯仿抽提纯化，分离去除蛋白质。

最后用乙醇沉淀洗出DNA。;2.材料与方法;;⑵方法：;Ⅱ破碎WBC;Ⅲ抽提DNA;Ⅳ沉淀DNA;二、琼脂糖凝胶电泳;⑶电泳介质;⑷.DNA分子的电荷效应：;⑸.DNA琼脂糖电泳的分子筛效应：;②;③琼脂糖的浓度;①示踪染料：

有致癌性:EB，吖啶橙等;

无毒的染料：goldviewI核酸染料等;;⑴实验材料：

全血基因组总DNA

⑵.实验试剂：

琼脂糖

5×TAE电泳缓冲液

6×电泳载样缓冲液（6×loadingdye）：

0.25％溴酚蓝，0.25%二甲苯青，40％(w/v)蔗糖水溶液，贮存于4℃。

goldviewI型核酸染料：

每10μlDNA加入2μl染料。;⑶.实验仪器;凝胶成像系统;4.操作步骤;溶胶;上样准备;凝胶冷却至50℃，加goldviewI2μl摇匀;;加缓冲液;准备样品;点样;电泳;;谢谢大家！