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2025年病理学基础与临床病理手册

第1章组织学基础与细胞形态学

1.1显微镜技术与制片方法

光学显微镜的成像原理基于光的折射与反射，其核心部件包括物镜（如4×、10×、40×、100×油镜）、聚光镜及目镜。当光线穿过载玻片上的样本时，物镜将样本放大成实像，再经目镜二次放大，最终投射至视网膜或CCD传感器。透明染色是制片的关键步骤，目的是利用染料与组织颜色的亲和性，使细胞结构在光学显微镜下可见。常用的苏木精-伊红（HE）染色法中，苏木精将细胞核染成蓝色，伊红将细胞质和细胞外基质染成粉红色，这是病理诊断最基础的染色方案。

玻片制备需严格遵循无菌操作流程，首先用解剖刀在载玻片上划出定位线，再涂抹组织块，随后滴加1%碘化钾溶液使组织变透明，最后盖上盖玻片。若需观察细胞间隙，需先滴加柠檬酸钠使组织膨胀，再滴加1%碘化钾。制片过程中必须注意样本厚度，过厚会导致光线无法穿透，影响成像质量；过薄则细胞结构模糊。通常组织块厚度控制在1-2mm，若需观察细胞核细节，则需压片使组织变薄至0.5-1mm。油镜观察需使用100%的二甲苯或二甲苯-丙酮混合物作为浸媒，将盖玻片上的100×物镜完全浸没，以消除光折射损失，获得最大分辨率。若使用40×物镜，则需使用75%的二甲苯-丙酮混合物。

显微镜的目镜焦距通常为18mm，物镜焦距分别为16.7