转基因小鼠技术.pptVIP

2026/6/21基因打靶的简易程序

2026/6/22优点：外源基因整合情况的可控性高可预先在细胞水平检测外源基因的拷贝数、定位、表达的水平及插入的稳定性外源基因导入ES细胞的方法多样，细胞鉴定及筛选方便缺点：ES细胞系建立及培养困难维持ES细胞的未分化及多向分化潜能不易所得个体为嵌合体胚胎干细胞（ES细胞）法

2026/6/23

2026/6/24主要是利用反转录病毒的长末端重复序列(LTR)区域具有转录启动子活性的特点,将外源基因连接到LTR下游进行基因重组后,再包装成为高滴度病毒颗粒,去直接感染受精卵或显微注入囊胚腔中,携带外源基因的反转录病毒DNA可以整合到宿主染色体上。3、逆转录病毒感染法

2026/6/253、逆转录病毒感染法优点由于反转录病毒的高效率感染和在宿主细胞DNA中的高度整合特性,大大提高基因转移的效率细菌质粒和噬菌体载体只能将目的基因运载至细菌中扩增和表达。病毒载体是较理想的真核基因工程载体缺点获得纯合体的转基因动物的机会少病毒载体构建复杂转入的外源基因的大小受到限制,10kb转入病毒自身基因的复制表达

2026/6/264、体细胞核移植法首先将目标基因转移到体外培育的动物体细胞中,筛选出阳性转基因细胞并进行繁殖,制备出供移植用的细胞核供体。然后将转基因细胞核供体移植到去核的卵母细胞中,重构胚胎经过激活和培养后,移植到代孕小鼠中1997年,英国Ro