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（新）结核T细胞斑点试验(2篇）

第一篇

结核T细胞斑点试验（T-SPOT.TB）是基于γ干扰素释放试验（IGRA）原理的结核分枝杆菌感染检测技术，其核心在于通过捕获结核特异性抗原刺激下外周血效应T细胞分泌的γ干扰素，精准判断机体是否存在结核分枝杆菌感染。该技术自2001年投入临床以来，凭借高特异性、不受卡介苗（BCG）接种干扰等优势，已成为全球结核防控体系中的关键工具之一。

一、T-SPOT.TB的技术原理与核心机制

T-SPOT.TB的本质是检测机体针对结核分枝杆菌的细胞免疫记忆反应。当结核分枝杆菌侵入人体后，抗原提呈细胞会将其特异性抗原呈递给CD4+T细胞，激活后的T细胞会分化为记忆T细胞并长期存在于外周血中。当再次接触相同抗原时，记忆T细胞会迅速活化，分泌大量γ干扰素。试验中使用的特异性抗原为早期分泌抗原靶6（ESAT-6）和培养滤液蛋白10（CFP-10），这两种抗原由结核分枝杆菌基因组RD1区域编码，而卡介苗及绝大多数非结核分枝杆菌（如牛分枝杆菌、鸟分枝杆菌等）缺乏该区域，因此可有效避免交叉反应导致的假阳性。

其技术流程可分为四个关键步骤：

1.外周血单个核细胞（PBMC）分离：采集5-10mLEDTA抗凝外周血，通过密度梯度离心法（Ficoll-Hypaque分离液）分离PBMC，去除红细胞和粒细胞，获得纯度≥90%的PBMC悬液。

2.抗原刺激培养：将PBMC