抗氧化DPPH法自由基清除试验酶标仪避光反应作业指导书.docVIP

抗氧化DPPH法自由基清除试验酶标仪避光反应作业指导书.doc

抗氧化DPPH法自由基清除试验酶标仪避光反应作业指导书

一、试验原理与目的

DPPH（1,1-二苯基-2-三硝基苯肼）是一种稳定的有机自由基，在有机溶剂中通常呈现深紫色，其最大吸收波长为517nm。当存在抗氧化物质时，DPPH自由基会被还原，溶液颜色逐渐变浅，吸光度随之降低。通过测定反应前后吸光度的变化，可以计算出样品对DPPH自由基的清除率，从而评估样品的抗氧化能力。

本试验旨在利用酶标仪的高通量检测优势，结合避光反应条件，准确、高效地测定各类样品（如植物提取物、食品添加剂、药物成分等）的DPPH自由基清除能力，为产品研发、质量控制及科学研究提供可靠的数据支持。

二、试验材料与设备准备

（一）材料

DPPH试剂：分析纯，购自正规化学试剂供应商，需在避光、干燥条件下保存，避免试剂失效。

有机溶剂：无水乙醇或甲醇，色谱纯，确保试剂纯度，避免杂质对试验结果产生干扰。

标准抗氧化剂：如维生素C（Vc）、Trolox（水溶性维生素E类似物）等，用于绘制标准曲线，验证试验体系的准确性。

待测样品：根据试验需求准备，可为液体、固体或半固体样品。固体样品需提前研磨成细粉，并用合适的溶剂进行提取；液体样品可直接稀释或适当处理后使用。

酶标板：96孔聚苯乙烯酶标板，选择透明或黑色板。黑色酶标板具有更好的避光效果，可减少外界光线对反应的影响，优先推荐使用。