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生物技术原理与应用手册

第1章生物技术原理与应用手册

1.1核酸的双螺旋结构与复制机制

双螺旋结构的发现与特征：1953年沃森和克里克基于查戈夫法则（Chargaffsrules）及X射线衍射数据，提出DNA双螺旋结构。该结构中，两条反向平行的多核苷酸链通过碱基互补配对（A-T,G-C）形成氢键连接，两条链之间以0.34nm宽度的磷酸二酯键连接，直径为2nm，每圈螺旋上升3.4nm。碱基配对规则与氢键数量：腺嘌呤（A）总是与胸腺嘧啶（T）配对，形成2个氢键；鸟嘌呤（G）总是与胞嘧啶（C）配对，形成3个氢键。这种特异性配对确保了遗传信息的高保真复制，防止了序列的随机错误。

复制起始与解旋酶作用：在复制起始点（Originofreplication）附近，解旋酶（Helicase）利用ATP水解供能解开双链DNA，形成复制叉（Replicationfork）。在真核生物中，如人类，复制起点通常位于染色体长臂（如13q14），复制起始时间多在S期G1晚期（约S8.5h）。半保留复制过程：DNA聚合酶（DNAPolymerase）以亲本链为模板，按照碱基互补原则合成新链。DNA聚合酶需要引物（Primer）提供3-OH末端才能起始合成，且只能沿5→3方向合成，具有5→3聚合酶活性。前导链与滞后链的合成策