第二节-重组体导入受体细胞的原理与技术.pptVIP

第二节重组体导入受体细胞的原理与技术;一、重组DNA导入大肠杆菌的方法;（一）转化（transformation）;一、重组DNA导入大肠杆菌的方法;一、重组DNA导入大肠杆菌的方法;一、重组DNA导入大肠杆菌的方法;一、重组DNA导入大肠杆菌的方法;一、重组DNA导入大肠杆菌的方法;一、重组DNA导入大肠杆菌的方法;一、重组DNA导入大肠杆菌的方法;（二）转导;体外包装过程;二、重组DNA导入真核细胞;1.利用原生质体进行转化;酵母;4.电击转化;二、重组DNA导入真核细胞;（二）导入植物细胞;（二）导入植物细胞;（二）导入植物细胞;（二）导入植物细胞;在饲养平皿的滤纸上培养2天;又称生物弹击法、微弹轰击法，借助高速金属微粒将DNA分子引入活细胞的转化技术。;基因枪;具体操作;植物细胞;二、重组DNA导入真核细胞;原理：;操作简便，成本低廉、可大批量转染、对细胞毒性小、效果稳定，但转染效率低。;2.脂质体介导法;脂质体（lipofectin）载体法;应用玻璃显微注射器，直接把外源DNA注射到宿主细胞核里，使其整合到染色体上。;显微注射法(microinjection);二乙氨乙基（DEAE）葡聚糖为多聚阳离子试剂，能促进哺乳动物细胞摄入外源DNA。;DEAE-dextran;导入外源DNA的几种方法;三、转化率及影响因素;三、转化率及影响因素;