小鼠繁殖建系及纯合子筛选方法.pdfVIP

鼠繁殖建系(以小鼠为例)

一．说明：

原核显微注射方法制作小鼠时，转入的目的仅仅只是整合在二倍体动物的其中

一条上，所以是半合子，它的后代只有一部分带有整合的,有的没有目的。

所以，小鼠需要一个筛选和纯化过程，以期获得纯合子的小鼠。通常的方法是，

制作同一批鼠后，将其中一的部分与正常的野生型小鼠杂交，检测后代的整合几率，

再通过同一窝的阳性雌雄小鼠交配，在的同源重组作用下，最终得到纯合子小鼠。

由于目的随机整合到组，因此首代小鼠将会有不同的整合位点。整合的拷

贝数可能在不同的首代小鼠中也不同。由于这些，每一个首代鼠需要作为一

个独立的谱系对待并且与其它首代小鼠分开来进行繁殖。每个首代小鼠的子代

都需要进行遗传和表达的检测。由于不同的整合位点和拷贝数，每一个首代