PCR技术及其应用:反向PCR、定点突变与荧光定量PCR.pdf

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应用1:反向PCR测定未知区域

当的某些序列已知,而需要扩增已知序列两端的未知序列时,

可采用反向PCR技术。原理:用限制性内切酶切割该,随后使

用连接酶将获得的酶切产物环化,这样就获得了已知序列两侧携带

有未知序列的环状分子。以该已知序列为模板设计一对相反方向的

特异性引物,该引物对已知序列反向,但对未知序列却是相向的,从而

得以扩增出未知序列。

应用2:P

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