经典免疫学试验沉淀反应2.ppt

经典免疫学试验沉淀反应;(优选)经典免疫学试验沉淀反应;;返回总目录;根据沉淀反应的介质和检测方法的不同,

沉淀反应可分为:

液相内的沉淀反应

凝胶内的沉淀反应;第一节液体内沉淀试验

根据沉淀现象的不同,液体内沉淀又可分为三类:

絮状沉淀

环状沉淀

免疫浊度沉淀;一、絮状沉淀试验

絮状沉淀试验是一项经典实验技术。曾用于测定梅毒抗体的Kahn试验是絮状沉淀的代表试验,现今已被更简便而敏感的USR或RPR方法替代。;;(二)操作步骤

1.抗原稀释法

(1)将可溶性抗原作一系列倍比稀释。

(2)各管加入一定浓度的适量抗血清。

(3)振摇使抗原、抗体充分混匀,置37℃孵育。

(4)产生沉淀量随抗原量而不同,以出现沉淀物最多的管为最适比例管。;2.抗体稀释法

本法采用抗原量恒定与不同倍比稀释度的抗体反应,出现沉淀物最多的管为抗体最适比例管。

3.方阵滴定法

抗原和抗体同时稀释,亦称棋盘(checkerboard)滴定法,是前二法的结合,可一次完成抗原和抗体的滴定并找出抗原、抗体的最适比。

;(三)方法评价

絮状沉淀试验方法简单,设备要求低,敏感度较低,受抗原抗体比例影响非常明显,目前多用以测定抗原抗体反应的最适比。

;二、环状沉淀试验

环状沉淀(ringpr

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