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马铃薯多酚氧化酶制备

及性质实验一、实验目的1.学习从组织细胞中制备酶的方法。2.掌握多酚氧化酶的作用及各种因素对其作用的影响二、实验原理多酚氧化酶是一种含铜的酶，其最适pH值为6～7。由多酚氧化酶催化的反应，如以邻苯二酚为底物，可以被氧化形成邻苯二醌。由多酚氧化酶催化的氧化还原反应可通过溶液的颜色的变化鉴定，这个反应在自然界中是常见的，如去皮的马铃薯和水果变成褐色就是由于该酶作用的结果.多酚氧化酶的最适底物是邻苯二酚(儿茶酚)。间苯二酚和对苯二酚与邻苯二酚的结构相似，它们也可以被氧化为各种有色物质。

酶是生物催化剂，其催化活性易受各种因素的影响，如温度、pH、底物种类、底物浓度、酶浓度以及抑制剂和蛋白质变性剂等都会改变其生物催化活性。

三、实验器材1.匀浆机

2.小刀，纱布，漏斗，其它玻璃器皿

3.离心机

4.冰箱

5.恒温水浴

四、材料与试剂1.马铃薯

2.0.1mol/L的NaF溶液:将4.2g氟化钠溶于1000mL水中。

3.0.01mol/L的邻苯二酚溶液:将1.1g邻苯二酚溶解于1000mL水中,用稀NaOH调节溶液的pH值为6.0,防止其自身的氧化作用。当溶液变成褐色时，应重新配制。新配制的溶液应贮存于棕色瓶中。

4.pH6.8的磷酸盐缓冲液

5.0