李冬民详解基因编辑定点突变与打靶技巧解析.pptVIP

定点突变与基因打靶技术;第一节基因定点突变;基因突变涉及单个碱基或片断的替换，基因片断的插入与删除等。

依据其特点可将基因突变技术分两大类：

1.随机突变表型筛选

2.位点特异性突变定点突变

;点突变：指单个碱基的突变，简而言之突变发生在基因的一种点上，故称点突变

点突变的类型

1）碱基替换

a.转换：同类碱基间

b.颠换：不同类型间的碱基

2）碱基的增长及缺失

;点突变的分子效应：

突变发生在基因编码区

a.同义突变:因为遗传密码有兼性，若突变的密码子编码同样的氨基酸普通对蛋白质的结构和功效没有影响

b.错义突变:碱基正确置换使mRNA的某一种密码子变成编码另一种氨基酸的密码子的突变;c.无义突变（nonsensemutation）：是指因为某个碱基的变化使代表某种氨基酸的密码子突变为终止密码子，从而使肽链合成提前终止。编码氨基酸的密码子突变为终止密码子，使肽链合成中断。

;1.定义：按照人们的意愿对基因的编码区和表示调控区定向进行缺失、插入或碱基替换等过程。

;3.定点突变的类型;DNA定点突变的种类

寡聚核苷酸介导

替换、插入、删除

盒式突变

PCR介导;III.基因定点突变;（1）寡聚核苷酸介导法;