基因酶切片段图谱绘制与深度解析.pptVIP

DNA的酶切图谱构建和分析PPT讲座;1.试验目标和要求

学习和掌握限制性内切酶的特性、酶解和琼脂糖凝胶电泳的操作方法.掌握利用限制性内切酶构建大片段DNA图谱原理与技术并了解限制性内切酶是DNA重组技术的核心工具，琼脂糖凝胶电泳是分离鉴定DNA片段的有效方法。;2.相关基础知识

限制性核酸内切酶：是一类能识别双链DNA分子特异性核酸序列的DNA水解酶。是体外剪切基因片段的主要工具，所以经常与核酸聚合酶、连接酶以及末端修饰酶等一起称为工具酶。限制性核酸内切酶不但是DNA重组中主要的工具，而且还能够用于基因组酶切图谱的鉴定。;1)寄主控制的限制与修饰现象

2)核酸限制性内切酶的类型与基本特性

3)同裂酶和同尾酶

4)核酸限制性内切酶的命名法

5)影响核酸限制性内切酶活性的原因;1)寄主控制的限制与修饰现象;2)限制性核酸内切酶的类型及特性

按限制酶的组成、与修饰酶活性关系以及切断核酸的情况不同，分为三类：

Ⅰ型

Ⅱ型*

Ⅲ型;第一类（I型）

限制性内切酶能识别专一的核苷酸次序，并在识别点附近的某些核苷酸上切割DNA分子中的双链，但是切割的核苷酸次序没有专一性，是随机的。此类限制性内切酶在DNA重组技术或基因工程中用处不大，无法用于分析DNA结构或克隆基因。此类酶如EcoB、EcoK等。;