线虫培养与繁殖技术完整指南.pdfVIP

线虫生长培养基（NematodeGrowthMedium，NGM）的配制

1）称取蛋白胨（peptone）2.5g，琼脂20g，NaCl3g，置于洁净2000mL玻璃三角瓶，

加入蒸馏水975ml，120℃高压蒸汽灭菌30min，之后置于55℃水浴锅中冷却。

离却未完全融化时磕在准备好的平板中待液体吸干后即可倒置培养般几个小时后即有大量活跃的在爬动用转移到新平板培养

2）依次加入5mg/ml胆固醇（乙醇溶解，不灭菌）1ml，高压灭菌的1MMgSO4，1MCaCl2，

1MKPO4缓冲液（pH6.0）各1ml，摇匀即可。1MKPO4缓冲液的配置方法为：称取108.3g

KH2PO4和35.6gK2HPO4，溶于1000mL蒸馏水中，调节pH值到6.0即可。

1.3倒板

1）倒平板在无菌条件下进行，应保证倒入每个无菌培养皿（直径6cm）的培养基量基

本一致，否则平板的厚薄相差太大将会影响观察。也可以用移液器分装8-9ml到每一个培养

皿中，保证每个平板厚度基本一致。

2）将倒好的平板在室温下放置1~2天，一方面可以检验是否有污染，一