DNA甲基化样本处理及检测技术专家共识PPT.pptxVIP

DNA甲基化样本处理及检测技术专家共识

目录02样本前处理流程01样本采集与保存规范03甲基化检测核心技术04数据分析与解读05质量控制体系06临床应用与展望

样本采集与保存规范01

适用样本类型选择标准唾液或口腔拭子非侵入性采集方式适用于大规模流行病学研究，但需注意唾液中的细菌DNA可能干扰人源DNA甲基化检测，建议使用专用保存液稳定样本。组织样本新鲜冷冻组织（如肿瘤组织）是理想选择，需在离体30分钟内速冻于液氮，防止甲基化谱降解。石蜡包埋组织（FFPE）需评估脱蜡和DNA提取效率，适用于回顾性研究。全血样本优先选择EDTA或肝素抗凝全血，因其白细胞DNA甲基化稳定性高，适用于表观遗传学研究。需注意采集后4小时内分离血浆/血清，避免溶血影响DNA质量。

EDTA抗凝管无核酸酶保存管适用于全血DNA甲基化分析，可有效抑制核酸酶活性，避免DNA降解。禁止使用肝素钠抗凝管，因其会干扰后续PCR扩增效率。组织样本需使用预冷无核酸酶冻存管，内衬RNAlater等保存液，防止甲基化修饰在常温下丢失。采集容器与抗凝剂要求专用唾液采集器含DNA稳定剂的唾液采集盒能延长样本保存时间（室温下可达2周），避免反复冻融导致的甲基化偏移。避免玻璃容器玻璃材质可能吸附DNA并诱发氧化损伤，推荐使用聚丙烯材质的低温冻存管。

运输温度及时效控制实时温度监控运输过程中需配备温度记录仪，数据需存档备查，尤其对于多中