T3 DNA连接酶用户手册V2.0：高效连接与修复指南.pdfVIP

用户手册

版本2.0

产品名称:T3连接酶

货号:T3DL‑100,T3DL‑200,T3DL‑OEM,B‑RL2

描述:

T3连接酶可以连接平末端和黏性末端，并修复双链中的单链缺口。在没有20‑30%PEG6000的情况

下，T3DNA连接酶对平末端连接的效率非常低。T3DNA连接酶在连接A/T突出末端时的效率高于C/G配对末

端。T3DNA连接酶在1.0MNaCl或KCl中仍保留95%的活性，最佳浓度为300mM。

协议：

将50ng与插入片段以3倍摩尔过量混合。用dHO调整体积至10μl。加入10μl的2倍连接

2

反应缓冲液并混匀。加入1T3DNA连接酶并充分混匀。短暂离心后，在室温（25°C）下孵育

15‑30分钟。置于冰上冷却，然后进行转化或在‑20°C。

不要热失活。热失活会显著降低转化效率。

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