单个核细胞分离.ppt

单个核细胞分离

实验目的1．熟悉免疫细胞分离的常用方法。2．掌握外周血单个核细胞分离方法的原理、操作规程。

免疫系统免疫器官免疫细胞免疫分子

外周血细胞成分淋巴细胞单核细胞粒细胞红细胞和血小板

不同细胞密度不同人的红细胞密度为1.093粒细胞密度为1.092单个核细胞（淋巴细胞和单核细胞）的密度为1.075-1.090血小板：1.030~1.035

细胞分离基本原理不同细胞密度不同不同细胞表面生物学特性不同不同细胞表面分化抗原不同

人外周血单个核细胞（peripheralbloodmononuclearcell，PBMC）包括淋巴细胞和单核细胞,是免疫学实验中常用的细胞群。

【实验原理】人外周血单个核细胞的体积、形态和比重与外周血其他细胞不同。因此利用一种介于1.075～1.090之间而近于等渗的聚蔗糖-泛影葡胺（ficoll-hypaque比重1.077±0.001）混合分离液作密度梯度离心，离心后不同比重的血细胞在分离液中呈梯度分布。从而分离出PBMC。

Ficoll分层液聚蔗糖-泛影葡胺:商品名为Ficoll,其密度为1.077±0.001。主要用于分离外周血中的单个核细胞，是一种单次差速密度梯度离心的分离法。其主要成分:2份浓度为