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动物模型实验特异度验证标准

动物模型实验特异度验证标准

一、（1）基因编辑动物模型的靶向修饰准确性验证。在构建基因敲除、敲入或点突变动物模型时，靶向修饰的准确性直接决定实验结果的特异度。需通过多重分子生物学技术交叉验证：首先采用PCR产物测序技术，对目标基因编辑区域进行全长扩增与Sanger测序，比对野生型序列确认碱基插入、缺失或替换的精确位点，确保无脱靶导致的非预期突变；其次利用SouthernBlot技术检测基因组DNA，通过特异性探针杂交验证基因修饰的拷贝数及整合位点，排除随机插入风险；针对CRISPR/Cas9等基因编辑技术，还需通过全基因组测序或脱靶预测算法（如CRISPR-De