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亚硝酸根实验测定方法

一、分光光度法

（一）N-（1-萘基）-乙二胺分光光度法

1.原理

在酸性条件下，亚硝酸根与对氨基苯磺酸发生重氮化反应，生成重氮盐，随后与N-（1-萘基）-乙二胺偶合生成紫红色染料，其颜色深浅与亚硝酸根浓度成正比，在540nm波长处测定吸光度，从而计算出亚硝酸根的含量。

2.试剂与仪器

试剂：对氨基苯磺酸溶液（4g/L），称取0.4g对氨基苯磺酸溶于100mL体积比为1:1的乙酸水溶液中，避光保存；N-（1-萘基）-乙二胺盐酸盐溶液（2g/L），称取0.2gN-（1-萘基）-乙二胺盐酸盐溶于100mL水中，避光保存，若溶液出现颜色则需重新配制；亚硝酸钠标准储备液（100mg/L），准确称取0.1500g干燥的亚硝酸钠（优级纯），溶于水并定容至1000mL，避光保存；亚硝酸钠标准使用液（1mg/L），临用时将标准储备液稀释100倍；乙酸-乙酸钠缓冲溶液（pH=4.0），称取16.4g乙酸钠溶于水，加入60mL冰乙酸，用水稀释至1000mL。

仪器：可见分光光度计；50mL具塞比色管；移液管；容量瓶等。

3.实验步骤

标准曲线绘制：分别吸取0、0.5、1.0、2.0、3.0、4.0、5.0mL亚硝酸钠标准使用液于50mL具塞比色管中，加水至25mL。加入2.5mL对氨基苯磺酸溶液，摇匀，静置3~5min。再加入1.5mLN-（1-萘基）-乙二胺盐酸盐溶液，加