高效液相色谱性能影响因素探讨.pptVIP

影响色谱峰扩展的原因及分离操作条件的选择11-13班第1页

一、柱内扩展二、分离条件的选择三、柱外扩展四、习题巩固第2页

高效液相色谱和气相色谱的基本原理一致，它们的区分在于流动相不同。因为必须考虑气体和液体之间粘度、扩散系数、密度等方面的差别，影响高效液相色谱的色谱峰扩展原因可分为：柱内扩展原因和柱外扩展原因。第3页

一、柱内扩展原因柱内扩展的概念：柱内扩展是指组分在色谱柱内移动时，其谱带随时间变宽的现象，又称柱内扩展。范德姆特方程（VanDeemter）对其同样适用。影响柱内扩展的原因主要有：1.涡流扩散项A;2.纵向扩散项B/u3.传质阻力项Cu:固定相传质阻力、流动相传质阻力第4页

柱内扩展原因1.涡流扩散项：采用粒度更小、更均匀的球形固定相，因此高效液相色谱的涡流扩散项A很小。2.纵向扩散项B/u：常数项B为2?Dm(因为高效液相色谱的流动相为液体，粘度比气体大很多，分子的扩散速度比较小，故Dm比气体的Dg小,Dm比Dg小4~5个数量级)，因为高效液相色谱法采用高压液体流动相，因此流动相的流速u也相对较大，由B/u=2?Dm/u可看出，纵向扩散项B/u的值很小，能够忽视不计。第5页

柱内扩展原因3.传质阻力Cu：为固定相传质阻力和流动相传质阻力之和。（1）固定相传质阻力HS：采用化学键合相，“固定液”只是键合在载体表面的单分子层，液膜很薄，因此，固定相传