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细胞培养操作程序规定

一、总则

细胞培养是生物医学研究中的基础技术，广泛应用于药物研发、疾病模型构建等领域。为确保细胞培养操作的规范性、高效性和安全性，特制定本操作程序规定。本规定适用于所有涉及细胞培养工作的实验室人员，旨在统一操作标准，降低实验误差，保障实验结果的可靠性。

二、实验室准备与设备要求

（一）实验室环境

1.实验室应位于洁净区域，保持相对恒温（22±2℃）、恒湿（50±10%），避免阳光直射和强气流。

2.实验室需定期进行空气消毒（如使用紫外线照射或超净工作台循环风过滤），每周至少消毒2次。

3.地面、墙面、天棚应采用易清洁材料，保持无尘无死角。

（二）设备要求

1.超净工作台：使用前需进行空间灭菌（75%酒精喷洒或紫外线照射30分钟），并确认工作台尘埃粒子数符合标准（≥3.5级）。

2.CO?培养箱：定期校准CO?浓度（±5%），湿度控制在50%-60%，温度设定在37℃±0.5℃。

3.生物安全柜：使用前检查风量（≥100级），过滤系统状态，并记录运行参数。

4.冰箱与冷冻柜：低温保存设备需定期检测温度（-20℃冰箱≤-20℃，-80℃冰箱≤-85℃），并使用带刻度的温度计校准。

三、细胞培养基本操作规程

（一）细胞复苏与接种

1.解冻细胞：在37℃水浴中缓慢解冻，立即加入预温培养基（如DMEM/F12+10%FBS），吹打混匀后转移至培养皿。

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