蛋白质相互作用免疫共沉淀实验指南.pdfVIP

Co‑IP(免疫共沉淀)

1.

实验原理

免疫共沉淀(Co‑Immunoprecipitation)是以抗体和抗原之间的专一性作用为基础

的用于研究蛋白质相互作用的经典方法。是确定两种蛋白质在完整细胞内生理性相互作

用的有效方法。

当细胞在非变性条件下被裂解时，完整细胞内存在的许多蛋白质‑蛋白质间的相互作

用被保留了下来。当用预先在琼脂糖珠上的蛋白质A的抗体免疫沉淀A蛋白，那么与

A蛋白在体内结合的蛋白质B也能一起沉淀下来。再通过蛋白变性分离，对B蛋白进行检

测，进而证明两者间的相互作用。

这种方法得到的目的蛋白是在细胞内与目标蛋白天然结合的，符合体内实际情况，

得到的结果可信度高。这种方法常用于测定两种目标蛋白质是否在体内结合；也可用于

确定一种特定蛋白质的新作用搭档。解螺旋

2.

实验目的

用于研究两个蛋白质之间是否存在相互作用的实验方法之一。

3.

实验材料

3.1.

主要试剂(试剂参考)

试剂

Protein

A

beadsGE

Protein

G

beadsGE

抗体CST

等