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bca法测定蛋白质浓度bca法测定蛋白质浓度第1页

学习掌握BCA法测定蛋白质浓度基础原理。【试验目标】bca法测定蛋白质浓度第2页

【试验原理】

BCA(bicinchoninicacid,二辛可酸)法测定蛋白质原理与Lowery法相同,即在碱性条件下蛋白质与二价铜离子Cu2+络合,并将其还原成一价铜离子Cu1+。一价铜离子和BCA试剂反应,使其由原来苹果绿形成稳定紫蓝色复合物,在562nm有强烈光吸收,且吸光值和蛋白质浓度在广泛范围内有良好线性关系,所以可用于蛋白质浓度测定。BCA测定蛋白质范围是20μg/ml~200μg/ml,微量BCA测定范围在0.5μg/ml~10μg/ml。bca法测定蛋白质浓度第3页

Folin-酚试剂法(Lowry法)测定蛋白质浓度蛋白质在碱性溶液中其肽键与Cu2+螯合,形成蛋白质一铜复合物,此复合物使酚试剂磷钼酸还原,产生蓝色化合物,在一定条件下,利用蓝色深浅与蛋白质浓度线性关系作标准曲线并测定样品中蛋白质浓度。bca法测定蛋白质浓度第4页

【试验器材与试剂】

1．器材（1)仪器：分光光度计；恒温水浴箱；枪式移液管。（2)玻璃仪器：试管13支，吸管2ml1支、O.1ml3支。bca法测定蛋白质浓度第5页

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