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聚合酶链反应检验技术专家共识（2025版）

聚合酶链反应检验技术作为一种在分子诊断领域具有重要应用价值的方法，其原理基于对特定核酸序列的体外酶促扩增。该技术通过模拟DNA的天然复制过程，利用DNA聚合酶在体外条件下催化与模板链互补的引物延伸，从而实现对靶标序列的指数级扩增。自其问世以来，该技术已广泛应用于病原体检测、遗传病诊断、肿瘤标志物分析、法医学鉴定以及生命科学研究等多个关键领域，成为现代医学检验不可或缺的支柱性技术之一。随着分子生物学、材料科学及自动化技术的飞速发展，聚合酶链反应检验技术本身也在不断演进，衍生出了实时荧光定量、数字、逆转录、多重扩增等多种高灵敏度、高特异性的技术形式，极大地拓展了其应用边界和临床价值。为了规范技术操作、保证检验质量、推动技术合理应用与创新发展，特制定本专家共识，旨在为从事相关工作的检验人员、临床医生及研究人员提供系统、科学、实用的技术指导。

一、技术原理与核心要素

聚合酶链反应检验技术的核心在于三个基本步骤的循环往复：变性、退火和延伸。变性步骤通过加热使双链DNA模板解离为单链；退火步骤则在降温过程中，使特异性设计的寡核苷酸引物与模板单链上的互补序列结合；延伸步骤则在DNA聚合酶的催化下，以dNTPs为原料，从引物的3’端开始合成与模板链互补的新链。经过若干个这样的循环，靶标DNA片段的数量理论上呈2的n次方增长。

该技术的成功实施与结果可靠