SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳法测定蛋白质分子量.pptxVIP

SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳法测定蛋白质分子量生物化学与分子生物学核心实验技术解析

Contents目录SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳法测定蛋白质分子量01课程导入与基本原理02实验材料与试剂配制03凝胶制备与实验操作04结果分析与数据处理05技术拓展与实验室规范

CHAPTER01课程导入与基本原理从电场迁移到分子筛效应，解构SDS的核心分离机制

Electrophoresis电泳技术概述与PAGE简介聚丙烯酰胺凝胶电泳（PAGE）通过化学聚合形成三维网状结构，不仅依赖分子的净电荷进行分离，更凭借其独特的分子筛效应，实现了对复杂蛋白质混合物的高分辨率分离，是现代生物化学最核心的分析工具之一。垂直板电泳槽·实验室常用电泳设备01电荷驱动迁移：带电粒子在电场中发生定向迁移，迁移速度取决于净电荷量、颗粒大小及空间形状。02分子筛效应：聚丙烯酰胺凝胶形成致密的三维网状结构，有效阻碍大分子颗粒的自由移动，实现按尺寸分离。03高分辨率分离：兼具浓缩、电荷与分子筛三大效应，可将血清蛋白分离出12–25个独立组分。

PolymerizationMechanism聚丙烯酰胺凝胶的化学聚合原理聚丙烯酰胺凝胶的合成依赖于丙烯酰胺与交联剂的自由基聚合反应。通过精确控制单体比例、催化剂浓度及反应温度，可有效调节凝胶孔径大小，从而满足不同分子量范围蛋白质的分离需求。01丙烯酰胺(Acr)提供线性长链，甲叉