第十单元 微专题12　PCR相关问题归纳.pptxVIP

微专题12PCR相关

问题归纳;题型一利用PCR技术获取和扩增目的基因

【知识·方法】

利用PCR技术获取目的基因的过程图解;(1)目的基因位于获得的DNA片段中。

(2)第一轮循环,引物与模板互补(非对齐),但因为模板很长,子链沿模板延伸至其末端才终止,所以第一个循环扩增出来的新片段较长(Ⅰ链)。

(3)第二轮循环中以Ⅰ链为模板扩增时,子链(Ⅱ链)长度为“引物”到“引物”的长度,是需要的长度,但只是一条链,所以还不能分离出目的基因。

(4)第三轮循环,当以Ⅱ链为模板时,因为这个单链的长度就是需要扩增的长度,所以当第三轮循环完成时,获得的双链DNA片段(Ⅲ链所在的DNA片段),就是所需的目的基因。所以至少要3个循环才能分离出目的基因。;【类题·精练】

1.利用PCR技术扩增目的基因,其原理与细胞内DNA复制类似(见下图)。图中引物为单链DNA片段,它是子链合成延伸的基础。

(1)理论上推测,第四轮循环产物中含有引物A的DNA片段所占的比例为

。?

(2)在第轮循环产物中开始出现两条脱氧核苷酸链等长的DNA片段。;【解析】由图可知,由原来的每条母链为模板合成的两个新DNA分子中,只含有引物A或引物B,而以新合成的子链为模板合成新DNA分子时,两种引物都含有,故第四轮循环共产生16个DNA分子,其中含有引物A的DNA分子是15个(只有第四轮循环中,引物B以母链为模板