细胞培养污染及控制.pptVIP

第一节污染的类型及鉴别细胞培养过程中的污染不仅仅指微生物,而且还包括所有混入培养环境中的、对细胞生存有害或造成细胞不纯的物质,包括生物和化学物质。第1页/共44页

一、细菌污染细菌污染是实验室细胞培养中常见的污染,即使在细胞培养液中加入了抗菌素(一般为预防剂量),也可能因为操作不慎而引起污染。最常见的有革兰氏阳性菌,如枯草杆菌,以及大肠杆菌、假单胞菌等革兰氏阴性菌,其中又以白色葡萄球菌较常见。细菌污染初期由于培养体系的抗生素作用,其繁殖处于抑制状态,细胞生长不受明显影响.第2页/共44页

一、细菌污染培养细胞受细菌污染后,会出现培养液变混浊,pH改变。也有的培养液肉眼观察无多少改变,只能在镜下发现菌体才知污染。所以,每天应仔细观察。污染后细胞发生病理改变,胞内颗粒增多、增粗,最后变圆脱落死亡,造成试验失败和细胞株(系)丢失。第3页/共44页

被洋葱佰克霍尔德菌污染（假单胞菌属，是植物病原菌，因引起洋葱患病而得名)第4页/共44页

二、真菌污染是细胞培养过程中最常见的一种，尤在霉雨季节进行细胞培养更易污染。最常见的真菌:烟曲霉、黑曲菌、毛霉菌、白色念珠菌、酵母菌。第5页/共44页

培养细胞受真菌污染后，可见培养液中漂浮着白色或浅黄色小点，培养液一般不发生混浊;倒置显微镜下可见丝状、管状或树枝状菌丝纵横交错在细胞之间或培养基中，有的呈链