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生物技术生物科技企业研发助理实习生实习报告

一、摘要

2023年7月1日至2023年8月31日，我在一家生物技术企业担任研发助理实习生，主要负责细胞培养与分子克隆实验操作。期间独立完成120株重组质粒转化，转化成功率达85%，通过实时荧光定量PCR验证了其中98株表达量符合预期。熟练应用无菌操作技术，保障了200次实验无菌环境符合标准，培养的细胞系存活率稳定在92%以上。参与优化了5种酶切反应体系，使酶切效率平均提升18%。通过实践掌握了实验数据标准化记录方法，建立了包含12项关键指标的质粒质控流程，可复用该流程于同类实验操作中。

二、实习内容及过程

2023年7月1日至8月31日，我在一家专注于基因编辑技术的生物公司做研发助理。公司主要做CRISPR相关产品开发，实验室有30多台流式细胞仪和10套基因测序设备。我跟着师兄做细胞系构建和质粒表达实验。

第2周开始接触细胞培养，每天要传3次细胞，每次处理20皿，保证活细胞密度在1×10^5/mL。8周里独立完成120次质粒转染，用脂质体法转染85株细胞，阳性率80%，比之前用的电穿孔法高5%。转染后用GFP荧光筛选，挑出98株表达正常的细胞，用qPCR验证，目标基因Ct值平均在22.5，说明转录水平没问题。

第5周遇到大挑战，做酶切验证质粒纯度时，发现EcoRI和BamHI双酶切总有条带模糊。试了3次都没解决，师兄说可能是缓冲液pH值